رابطه سبک های دلبستگی و سبک های هویت با کفایت اجتماعی دانش آموزان دبیرستان

رابطه سبک های دلبستگی و سبک های هویت با کفایت اجتماعی دانش آموزان دبیرستان چکیده پایان نامه ( شامل خلاصه، اهداف، روش های اجرا و نتایج به دست آمده): این پژوهش با هدف بررسی رابطه بین سبک های دلبستگی و سبک های هویت با کفایت اجتماعی دانش آموزان دبیرستان تدوین شده است . این پژوهش از نوع تحقیقات همبستگی است . جامعه آماری شامل کلیه دانش آموزان دختر دوره متوسطه مدارس دولتی شهرستان گیلان غرب استان کرمانشاه بوده است. نمونه این پژوهش با استفاده از روش نمونه‌گیری تصادفی طبقه ای تعداد 240 نفر انتخاب شدند.و از پرسشنامه های کفایت اجتماعی ، پرسشنامه ی سبک های هویت، پرسشنامه سبک‌های دلسبتگی استفاده شد. داده‌ها با استفاده از آمار توصیفی مانند میانگین، انحراف معیار، هیستوگرام و آمار استنباطی، تحلیل رگرسیون چند متغیری و همبستگی پیرسون استفاده شده است. نتایج نشان داد بین سبک‌های دلبستگی و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. بین سبک‌های هویت و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. بدان معنا که بین نمرات سبک‌های دلبستگی اجتنابی و دوسوگرا با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط معکوس و معنی‌داری وجود دارد اما بین نمرات دلبستگی ایمن و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط معنی داری مشاهده نشد. بین نمرات سبک هویت سردرگم و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان درسطح01/0=α ارتباط معکوس و معنی‌داری تایید شدو همچنین بین سبک‌های هویت اطلاعاتی ، هنجاری و تعهد هویت با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط مستقیم و معنی‌داری (01/0 P≤)تایید شد. کلید واژه : سبک های دلبستگی ، سبک های هویت ، کفایت اجتماعی نظر استاد راهنما برای چاپ در پژوهش نامه دانشگاه مناسب است تاریخ وامضا: مناسب نیست فهرست مطالب عنوان صفحه چکیده : 1 فصل اول کلیات پژوهش 2 مقدمه 3 بیان مسأله 5 اهمیت و ضرورت تحقیق 7 اهداف پژوهش 9 هدف کلی 9 اهداف جزئی 9 فرضیه‌های پژوهش 9 سوال پژوهشی: 9 تعاریف متغیرها 9 تعاریف نظری 9 سبکهای دلبستگی 9 سبکهای هویت 10 کفایت اجتماعی 10 تعاریف عملیاتی 10 سبکهای دلبستگی 10 سبکهای هویت 11 کفایت اجتماعی 11 فصل دوم ادبیات و پیشینه پژوهش 12 کفایت اجتماعی: 13 کفایت اجتماعی، تمرکز بر رفتارهای فرا اجتماعی 14 مهارت ها و توانایی شناختی: 15 مهارتهای رفتاری 16 کفایت های هیجانی 16 آمایه های انگیزشی و انتظارات 17 کفایت اجتماعی و بهداشت روانی مثبت 17 دلبستگی 18 مفاهیم اساسی نظریه دلبستگی: 19 پایه های شکل گیری نظریه‌های دلبستگی 20 نظریه روان تحلیلی: 20 نظریه یادگیری 20 آنا فروید : 22 نظریه اشپیتز: 22 نظریه اریکسون: 22 نظریه وینی کات : 23 نظریه ماهلر: 23 نظریه شناختی : 24 مراحل دلبستگی 24 رویکرد رفتاری 24 مرحله پیش دلبستگی (تولد تا 6 هفتگی) 24 مرحله دلبستگی در حال انجام (6 هفتگی تا 6-8 ماهگی) 25 مرحله دلبستگی واضح (6-8 ماهگی تا 18 ماهگی- 2 سالگی) 25 تشکیل رابطه متقابل (18 ماهگی تا 2 سالگی و بعد از آن ) 26 الگوهای دلبستگی 27 دلبستگی اجتنابی یا مضطربانه- اجتنابی 27 دلبستگی مقاوم یا مضطربانه- مقاوم 28 دلبستگی آشفته - سردرگم یا مضطربانه- سردرگم 28 عوامل موثر بر کفیت دلبستگی : 29 انواع اختلالات دلبستگی 30 نوع اول: اختلال دلبستگی بدون تعلق (دل‌بسته) 30 نوع دوم: اختلال دلبستگی نامتمایز 30 نوع سوم: اختلال دلبستگی بازداری شده‌ (منع شده) 31 نوع چهارم: اختلال دلبستگی پرخاشگرانه 32 نوع پنجم: اختلال نقش وارونه (جابجا شده‌) 32 دلبستگی اولیه و روابط رمانتیک بزرگسالان 33 مواضع نظریه پردازان در رابطه با موضوع پژوهش 35 در زمینه هویت 35 تعریف هویت 35 دیدگاههای نظری درباره هویت 37 رویکرد ساختاری هویت 38 دیدگاه اریکسون 38 دیدگاه مارسیا 40 رویکرد فرآیندی به هویت 42 دیدگاه بورک (نظریه کنترل هویت) 42 دیدگاه برزونسکی به هویت 45 فرآیند هویت 46 محتوی هویت 47 شخصی، جمعی و اجتماعی 47 ساختار هویت 48 سبک‌های پردازش هویت 49 سبک پردازش هویت اطلاعاتی 50 سبک‌ پردازش هویت هنجاری 52 سبک پردازش هویت مغوشش – اجتنابی 54 یک مدل تصویری از سبک‌های هویت 56 عوامل موثر بر شکل‌گیری هویت 57 جایگاه خود در نظریه سبک های پردازش هویت 58 سبک‌های پردازش هویت و مبانی تعریف «خود» 59 سبک‌های پردازش هویت و جهت گیری علّی 59 سبک‌های هویت و مفروضه‌های معرفت شناختی 60 سبک پردازش هویت و اهداف تحصیلی و شغلی 61 سبک های پردازش هویت و روابط بین فردی 62 سبک‌های پردازش هویت و سن 62 رابطه سبک های هویت با عملکرد تحصیلی و پیشرفت تحصیلی 63 پیشینه مطالعاتی 66 فصل سوم روش پژوهش 69 طرح پژوهش 70 جامعه آماری: 70 حجم نمونه: 70 شیوه نمونه گیر ی: 71 روش گردآوری اطلاعات 71 نحوه نمره گذاری و تفسیر نتایج 71 ویژگی های روان سنجی 72 .پرسشنامه سنجش سبک هویت (ISI-G6) 73 پرسشنامه کفایت اجتماعی 75 روش تجزیه تحلیل داده ها: 76 فصل چهارم (تجزیه و تحلیل داده‌ها) 77 مقدمه: 78 4-1 : داده های توصیفی 78 4-2 : تحلیل داده ها 86 فصل پنجم بحث و نتیجه‌گیری 91 1-5 خلاصه پژوهش: 92 2-5 : بحث در چارچوب فرضیه‌های پژوهش 93 3-5 محدودیت‌های پژوهش 97 4-5 پیشنهادها 97 پیشنهادهای پژوهشی: 97 پیشنهادهای کاربردی: 98 منابع : 99 پیوست ها 107 فهرست جداول عنوان صفحه جدول شماره 3-1- پرسشنامه سبک های هویت برحسب مولفه های آن 73 جدول 4-1: شاخص‌های توصیفی سبک‌های دلبستگی دانش آموزان 78 جدول 4-2: شاخص‌های توصیفی سبک‌های هویت دانش آموزان 81 جدول 4-3: شاخص‌های توصیفی کفایت اجتماعی دانش آموزان 85 جدول 4-4 : ماتریس همبستگی سبک‌های دلبستگی و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان 87 جدول 4-5 : ماتریس همبستگی سبک‌های هویت و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان 88 جدول 4-6: خلاصه تحلیل رگرسیون چندمتغیری پیش‌بینی کفایت اجتماعی دانش‌آموزان از طریق سبک‌های دلبستگی و سبک‌های هویت 89 فهرست نمودار عنوان صفحه نمودار 2-1.مؤلفه های فرایند کنترل هویت (اقتباس از بورک، 2007) 44 نمودار 2-2. پیامدهای با خورد هماهنگ و ناهماهنگ درباره هویت فرد (کرپلمن، 2008) 45 نمودار 2-3 تطبیق سبک‌های پردازش هویت بر اساس فرایند «تعهد و کاوشگری» 57 نمودار 4-1: توزیع فراوانی نمرات سبک دلبستگی اجتنابی 79 نمودار 4-2: توزیع فراوانی نمرات سبک دلبستگی ایمن 80 نمودار 4-3: توزیع فراوانی نمرات سبک دلبستگی دوسوگرا 81 نمودار 4-4: توزیع فراوانی نمرات سبک هویت اطلاعاتی 82 نمودار 4-5: توزیع فراوانی نمرات سبک هویت هنجاری 83 نمودار 4-6: توزیع فراوانی نمرات سبک هویت سردرگم 84 نمودار 4-7: توزیع فراوانی نمرات تعهد هویت 85 نمودار 4-8: توزیع فراوانی نمرات کفایت اجتماعی 86 چکیده : این پژوهش با هدف بررسی رابطه بین سبک های دلبستگی و سبک های هویت با کفایت اجتماعی دانش آموزان دبیرستان تدوین شده است . این پژوهش از نوع تحقیقات همبستگی است . جامعه آماری شامل کلیه دانش آموزان دختر دوره متوسطه مدارس دولتی شهرستان گیلان غرب استان کرمانشاه بوده است. نمونه این پژوهش با استفاده از روش نمونه‌گیری تصادفی طبقه ای تعداد 240 نفر انتخاب شدند.و از پرسشنامه های کفایت اجتماعی ، پرسشنامه ی سبک های هویت، پرسشنامه سبک‌های دلسبتگی استفاده شد. داده‌ها با استفاده از آمار توصیفی مانند میانگین، انحراف معیار، هیستوگرام و آمار استنباطی، تحلیل رگرسیون چند متغیری و همبستگی پیرسون استفاده شده است. نتایج نشان داد بین سبک‌های دلبستگی و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. بین سبک‌های هویت و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. بدان معنا که بین نمرات سبک‌های دلبستگی اجتنابی و دوسوگرا با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط معکوس و معنی‌داری وجود دارد اما بین نمرات دلبستگی ایمن و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط معنی داری مشاهده نشد. بین نمرات سبک هویت سردرگم و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان درسطح01/0=α ارتباط معکوس و معنی‌داری تایید شدو همچنین بین سبک‌های هویت اطلاعاتی ، هنجاری و تعهد هویت با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان ارتباط مستقیم و معنی‌داری (01/0 P≤)تایید شد. کلید واژه : سبک های دلبستگی ، سبک های هویت ، کفایت اجتماعی فصل اول کلیات پژوهش مقدمه در مورد کفایت اجتماعی تعاریف متعددی از سوی روان‌شناسان و جامعه‌شناسان ارائه شده است کفایت به طور کلی رابطه‌ای است که هر ارگانیسم نسبت به وضع موجود با محیط خود برقرار می‌کند. مفهوم ضمنی آن این است که افراد درگیر فرآیندی مستمر برای ابراز استعدادهای خود واکنش نسبت به محیط و در عین حال تغییر دادن آن به گونه‌ای مؤثر و سالم می‌شود (افشارنیاکان، 1380). به علاوه می‌توان گفت که هرگاه تعادل جسمی و روحی فرد به گونه‌ای دچار اختلال شود که حالت ناخوشایندی به فرد دست بدهد و برای ایجاد توازن نیازمند به کارگیری نیروهای درونی و حمایتی خارجی باشد و در این اسلوب در بکارگیری ساز و کارهایی جدید موفق شود به شکل درست حل نماید فرآیند کفایت به وقوع پیوسته است (اسلامی‌نسب، 1383). اما کفایت اجتماعی به وضعیتی اطلاق می‌شود که افراد خود را به تدریج از روی عمد و غیرعمد تعدیل می‌کنند تا با فرهنگ موجود سازگار شوند، مانند رعایت عادت، عرف و یا تقلید (مصائبی، 1387). و این صحت نخواهد داشت جز اینکه کودک در یک محیط، این عاطفی‌گری و محبت مادرانه و پدرانه را بچشد و ارتباط عاطفی مناسبی با والدین خود برقرار نماید از این طریق زمینه را برای شکل‌گیری هویت مناسب و سازگاری اجتماعی مثبت و سازنده آماده نماید. بدون شک نوع ارتباط عاطفی با والدین یا نوع سبک دلبستگی یکی از عوامل بسیار تأثیرگذار است، در چگونگی شکل‌گیری هویت نوجوانان، هر کودکی که به دنیا می‌آید اولین کسی را که در بدو تولد مشاهده و لمس می‌کند مادر است در واقع کودک در حالی، دنیای بسته و امن جنبشی را وداع می‌گوید که امنیت از دست رفته را با آغوش پر مهر مادر میدان می‌کند و این پایگاه سرشار از عاطفه پایه‌گذار اولین روان‌بندهای عاطفی و طرحواره‌های ارتباطی در نوزاد است که بی‌شک متضمن امنیت روانی ـ عاطفی کودک در چند سال اول زندگی است و چه بسا اثرات طولانی مدت عواطف مادری، گستره زندگی فرد را در بر می‌گیرد (بالبی، 1969).نحوة شکل‌گیری و پرداخته شدن سبک‌های دلبستگی ارتباط وتأثیر بسیار زیادی در چگونگی بروزکفایت اجتماعی دارد چرا که کفایت اجتماعی به معنی آن است که افراد یا گروه‌ها رفتار خود را تعدیل و با فرهنگ و هنجارهای اجتماعی انطباق نمایند (اسماعیلی،1380). رشد انسان با گذر از دوران کودکی به پایان نمی‌رسد بلکه فرآیندی است مداوم، با گستره‌ای از تولد تا بزرگسالی ودر نهایت پیری، بعد از دوره کودکی، دوره‌ای آغاز می‌شود که نوجوانی نام دارد. در واقع این دوره، دورة گذر از کودکی به بزرگسالی است. این دوره مرز سنی کاملاً مشخصی ندارد اما از 12 سالگی آغاز می‌شود و تا آخرین سال‌های دهة زندگی یعنی تا رسیدن به رشد جسمانی کامل، ادامه می‌یابد. در این دوره نوجوان به بلوغ جنسی و جسمی می‌رسد و هویت فردی خود را از هویت خانوادگی جدا می‌کند (اتکینسون و همکاران؛ به نقل از براهنی و همکاران، 1382). یک وظیفه مهم نوجوانی، شکل‌گیری هویت است. هویت یک مجموعة به هم پیوسته است از ارزش‌های شخصی مرتبط با اهداف شغلی، ارتباطات و ارزش‌های مذهبی و سیالی می‌باشد (اریکسون، 1968). هویت در روانشناسی یکی از مشخصات شخصیت فرد به شمار می‌رود چنانکه در اغلب تعاریف هویت، این مسأله نهفته است که ما چه تعریفی از خود داریم (حاجیانی، 1387). دسترسی به یک هویت با ثبات نه تنها یک حس یکپارچه از خود فراهم می‌کند بلکه امکان پیشرفت و سازش‌های آینده را در سراسر زندگی ایجاد می‌کند (فابر و همکاران، 2003). یکی از مسائل مهم تحول انسان روند شکل‌گیری هویت است. این فرآیند از بدو تولد آغاز می‌گردد و در دورة نوجوانی به اوج می‌رسد، در واقع یکی از تکالیف عمده نوجوانی در جامعه تشکیل هویت است (رزمی، 1383). گلاسر (1982؛ به نقل از رزمی، 1383) اعتقاد دارد که هویت عبارت است از نیاز به احساس جدا و متمایز بودن از دیگران است، به نظر وی این نیاز نه تنها نیاز روانی و اساسی انسان است که همة مردم و در همة فرهنگ‌ها از بدو تولد تا مرگ دارا می‌باشند (گلاسر، 1982؛ به نقل از رزمی، 1383). سلیگمن (1991) معتقد است که به طور کلی شکل‌گیری هویت موفق در نوجوانان محصول چهار عامل رشد شناختی، ارتباط با والدین، تجارب خارج از خانواده و زمینه‌های گسترده اجتماعی دیگر است که از میان این عوامل نقش خانواده و ارتباطات عاطفی درون آن در شکل‌گیری هویت مورد تأکید قرار گرفته است به گونه‌ای که تعداد زیادی از پژوهشگران معتقدند که ارتباط کودک با والدین شکل‌گیری هویت او را تحت تأثیر قرار می‌دهد . بیان مسأله وقتی شخص برای رسیدن به یک نتیجه دلخواه رفتاری را بر میگزیند باید آن رفتار در دسترس باشد. مذاکره، ایفای نقش، ابراز وجود، مهارتهای محاورهای برای شروع و تداوم تعاملهای اجتماعی، مهارتهای فراگیری و یادگیری رفتار دوستانه با دیگران، از مولفه های اصلی مهارتهای رفتاری تلقی گردیدهاند) مهار تهای هیجانی و عاطفی مولفه سومی است که برای برقراری روابط مثبت با دیگران، ایجاد و گسترش اعتماد و روابط حمایتی دوجانبه، شناسایی و پاسخدهی مناسب به علائم هیجانی در تعاملهای اجتماعی یا مدیریت استرس لازم به نظر میرسد،) مهارتهای انگیزشی شامل ساختار ارزشمند فرد، سطح رشد اخلاقی و احساس اثربخشی و کنترل فرد و در .( نهایت احساس خودکارآمدی او میشود )فلنر و همکاران، 1990 ). بالبی (1969)به نقل از یزدانی(1390) فرآیند شکل‌گیری دلبستگی نوزاد و مادر را تشریع کرد و نشان داد که چگونه سیستم احساسات و رفتارهای دلبستگی، نوزاد را به مادر نزدیک و از خطر دور می‌سازد و جدایی از مادر اضطراب و درماندگی کودک را در پی خواهد داشت. حساسیت، پاسخ‌گویی و حضور فعال مادر و دسترسی منظم نوزاد به وی خطوط اصلی دلبستگی ایمن را در کودک ترسیم می‌کند. از این پایگاه امن که متضمن اعتماد کودک به دیگران و خود می‌باشد رفتار اکتشافی تقویت می‌شود و کنش‌وری اجتماعی گسترش می‌یابد. وقتی مادر بی‌تفاوت با طردکننده باشد، مشخصه‌های دلبستگی بر محور فقدان اعتماد به خود و دیگران شکل می‌گیرد. بر این اساس دلبستگی محصول تجربه‌های واقعی فرد در مورد حساسیت، پاسخ‌گو بودن و حضور فعال و منظم مادر در خلال سال‌های نوزادی، کودکی و نوجوانی می‌باشد. در چارچوب روابط بزرگسالی اکثر محققان بر اهمیت دلبستگی به منزله یکی از جنبه‌های ارتباطی و بر استمرار تحولی آن اتفاق نظر دارند. دورة نوجوانی دوره‌ای است همراه با تغییرات متعدد از لحاظ جسمانی و روحی، مهمترین مسأله‌ای که در این دوره مطرح است مسأله تکوین هویت شخصی است به این معنی که فرد باید به پرسش‌های تقلید: «من کیستم؟»، «مقصدم کجاست؟»، «جایگاه اجتماعی من کجاست؟، «شغل آیندة من چیست؟» پاسخ دهد، پاسخ‌گویی به این پرسش‌ها که چندین سال ادامه خواهد داشت، جستجو و کاوش در مورد پدیده‌ای به نام هویت است. پاسخگویی به این سؤالات شاید خیلی هم آسان نباشد اما یافتن پاسخ مناسب فایده بسیار مهم به حال نوجوانان و جامعه پیرامون آن خواهد داشت. انتخاب راه‌ها و ارزش‌های ممکن برای نوجوانان چندان ساده نیست، چرا که آن‌ها با طیف گسترده‌ای از انتخاب‌های ممکن مواجه می‌شوند و با توجه به تنوع انتخاب‌ها باید تصمیم بگیرند (اسماعیلی، 1380). در صورتی که خانواده پایگاه امنی باشد که نوجوان بتواند با اطمینان از این پایگاه به سوی دنیای بزرگترها پیش برود هویت تقویت می‌شود. نوجوانانی که احساس می‌کنند به والدین‌شان وابسته‌اند، اما در عین حال آزادند تا عقایدشان را بیان کنند هویت کسب کرده یا در حالت وقفه‌اند نوجوانی که هویت جعلی دارد معمولاً روابط صمیمی باوالدین دارد اما از فرصت جدا شدن سالم بی‌بهره بوده است و نوجوانی که دچار پراکندگی هویت است از کمترین رابطه صمیمانه برخوردار است (پالکین، 1994؛ به نقل از برک، 1383). بدون شک خانواده و محیط عاطفی اولین پایه‌گذار شخصیت و ارزش‌ها و معیارهای فکری است که نقش مهمی در تعیین سرنوشت و سبک خط‌مشی زندگی آینده فرد است و اخلاق و صحت و سلامت روانی فرد تا حدود بسیاری در گرو آن است. واکنش کودک نسبت به محیط خود تحت تأثیر موازین اجتماعی و فرهنگی و گروهی است که در میان آن بزرگ شده است. از آنجا که خانواده خود یک واحد اجتماعی است و ارزش‌ها و معیارهای اجتماعی از طریق آن به کودک متصل می‌شود به عنوان یک واسطه از لحاظ محیط اجتماعی به کودک اهمیت فراوانی دارد. به دیگر سخن چون خانواده که کانون تولد و زایش است پیش از وی شکل گرفته است تا مرحله‌ای که فرزند به شعور و آگاهی کافی برسد و در تعیین سرنوشت وی تأثیر فراوانی دارد (احدی و محسنی، 1380). لازم به ذکر است که در دورة نوجوانی فرد شاهد تغییر و تحولات بسیار بزرگی در عرصه جسمی، ذهنی، عاطفی و روانی است که به علت این تغییرات فراگیر در بسیاری از موارد کودک و نوجوان باید تلاش بسیاری در جهت کفایت اجتماعی نماید تلاشی که اگر بستر آن یعنی عوامل خانوادگی، عاطفی و هویتی نامنسب باشد بی‌فایده است. پژوهش حاضر درصدد پاسخ‌گویی به این سؤال است که آیا بین نوع سبک‌های دلبستگی، سبک‌های هویت با کفایت اجتماعی رابطه وجود دارد؟ اهمیت و ضرورت تحقیق یکی از عوامل تأثیرگذار مهم بر شکل‌گیری هویت نحوه روابط عاطفی درون خانواده به خصوص مادر است. به عبارت دیگر نوزاد انسان در خانواده رشد و نمو می‌کند و رفتارهای اجتماعی و ارزش‌ها را یاد می‌گیرد و می‌آموزد که چگونه با دیگران تعامل کند. بنابراین نوع سبک دلبستگی و ارتباط عاطفی درون خانوادگی می‌تواند زمینه‌ساز نحوة شکل‌گیری هویت در آینده باشد. بنابراین از آنجا که خانواده و نوع ارتباطات عاطفی درون آن در دورة نوجوانی عاملی بسیار مهم در شکل‌گیری هویت نوجوان است، لذا والدین می‌توانند با رجوع به الگوی تربیتی خود با بینش و بصیرت آگاهانه‌تری در مورد رفتار با کودک پیدا نمایند تا از گرایشی ناخواسته به الگوی تربیتی نامنناسب خودداری کنند و با شناخت کامل‌تر نسبت به اجرای سبک والدینی شایسته و کارآمد اقدام نمایند. همچنین لازم به یادآوری است نوجوانی به سبب اینکه تعارض و بحران است یا به گفته اهل نظر و فن دورة طوفان و فشار است؛ توجه به کفایت اجتماعی در این دوره امری بسیار ضروری است و با توجه به مطالب یاد شده بالا پیرامون اینکه نوع سبک دلبستگی می‌تواند عاملی تأثیرگذار بر هویت‌یابی نوجوان باشد و زمینه رفتار آینده را در فرد به وجود می‌آورد بنابراین بی‌لطف نخواهد بود که نحوة تأثیرگذاری و ارتابط دو متغیر یاد شده یعنی سبک دلبستگی و هویت را بر کفایت اجتماعی مورد توجه قرار دهیم چون که زمینه بروز رفتار سازگارانه و موافق با هنجارها و ارزش‌های شخصی، خانوادگی، اجتماعی و فرهنگی تا حدود زیادی در گرو آن خواهد بود که کودک ابتدا در خانواده محیط امنی داشته باشد تا در این محیط امن این هنجارها نهادینه شود و به نحو شایسته‌ای در نوجوانی و بزرگسالی به صورت رفتارهای سازگارانه خود را بروز دهد. هویت و عوامل تأثیرگذار بر آن یکی از مسائل مهم در دورة نوجوانی است که زیاد مورد تحقیق و پژوهش قرار گرفته است. مارسیا (1987) دربارة افرادی که به هویت دست یافته‌اند می‌گوید «روش ارتباطی این افراد با جهان دارای انعطاف زیادی است آن‌ها متفکر و درونگر هستند، زمانی که تحت تأثیر موقعیت استرس‌زا قرار می‌گیرند از نظر شناختی عملکرد خوبی دارند، اگر در معرض تغییرات ناگهانی قرار گیرند خود را نمی‌بازند». لازم به ذکر است بسیاری از مشکلات و معضلات جوانان و نوجوانان ناشی از عدم شکل‌گیری هویت ثابت و پایدار در آن‌هاست. نوجوانانی که هویت کسب کرده‌اند یا فعالانه آن را کاوش می‌کنند، احساس عزت‌نفس بیشتری می‌کنند یا تفکر نقادانه بیشتری دارند و در استدلال اخلاقی پیشرفته‌تر هستند. اما افرادی که هویت مناسبی ندارند، دچار مشکلات سازگاری می‌شوند، متعصب، متحجر و انعطاف‌ناپذیر هستند. بسیاری از این نوجوانان تعهدات خود را به صورت دفاعی به کار می‌برند و هرگونه اختلاف عقیده‌ای را تهدید قلمداد می‌کنند. معمولاً بسیاری از آن‌ها تفکر «برایم مهم نیست» را اختیار می‌کنند و تا حد زیادی گرفتار مسائل اجتماعی نامناسب نظیر بزهکاری، اعتیاد و ... می‌شوند (برک، 2003؛ به نقل سیدمحمدی، 1383). افرادی که در هنگام جستجوی هویت، اکتشاف نداشته‌اند دارای شخصیت متحجر هستند و اگر با موقعیتی مواجه شوند که ارزش‌های والدین در آن‌ها کارایی نداشته باشد به شدت احساس ترس و تهدید می‌کنند همچنین آن‌ها که نه اکتشاف و نه تعهد داشته‌اند هیچ جه معینی در زندگی ندارند و گسترده‌ترین دامنه آسیب‌شناسی را نشانمی‌دهند (به نقل از آقامحمدیان و همکاران، 1382). اهداف پژوهش هدف کلی تعیین رابطه بین سبک‌های دلبستگی و سبک‌های هویت و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی اهداف جزئی 1. تعیین رابطه بین سبک‌های دلبستگی باکفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی. 2.تعیین رابطه بین سبک‌های هویت با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی. 3.تعیین سهم سبک‌های دلبستگی و سبک‌های هویت در کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی. فرضیه‌های پژوهش 1- بین سبک‌های دلبستگی و کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. 2- بین سبک‌های هویت با کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی رابطه وجود دارد. سوال پژوهشی: سهم سبک‌های دلبستگی و سبک‌های هویت درپیش بینی کفایت اجتماعی دانش‌آموزان دبیرستانی.چقدر است؟ تعاریف متغیرها تعاریف نظری سبکهای دلبستگی دلبستگی پیوند عاطفی عمیقی است که با افرادی خاص در زندگی بر قرار می‌کنیم طوری که باعث شود وقتی با آن‌ها تعامل صورت می‌گیرد احساس شادی و نشاط کنیم و به هنگام استرس از اینکه در کنارمان هستند احساس آرامش داشته باشیم (برک، 2001؛ به نقل از سیدمحمدی، 1383). سبکهای هویت به آن دسته از فرآیندهای اجتماعی- شناختی مبتنی است که طی آن افراد بر اساس شیوه ترجیحی پردازش و ارزیابی اطلاعات مربوط به خود و تصمیمات فردی خود در وضعیت های متفاوت قرار میگیرند. دارای 4 مولفه جهت گیری اطلاعاتی -هنجاری- سردرگم / اجتنابی- تعهد میباشد. برزونسکی (2007). کفایت اجتماعی توانایی عملکرد انسان در اجرای استقلال شخصی ومسولیت پذیری اجتماعی است.فلنر،لیس و فیلیپس(19990)معتقدندکه کفایت اجتماعی شامل چهار مولفه به قرارزیر است الف)مهارت شناختی ب) مهارتهای رفتاری ج)مهارتهای هیجانی د)مهارتهای انگیزشی. تعاریف عملیاتی سبکهای دلبستگی در این پژوهش از پرسشنامه سبک‌های دلبستگی کولینز و رید استفاده می گردد که دارای 18 سؤال می‌باشد که برای هر یک از سبک‌های دلبستگی 6 سؤال در نظر گرفته شده است که سؤالات مربوط به سبک دلبستگی ایمن 1، 6، 8، 12، 13، 17 و سبک دلبستگی اجتنابی شامل سؤالات 2، 5، 7، 14، 12، 18 و سبک دلبستگی مضطرب، دوسوگرا شامل سؤالات 3، 4، 9، 10، 11، 15 می‌شود بنابراین نمرات به دست آمده از این پرسشنامه برای هر یک از سبک‌های دلبستگی تعریف عملیاتی آن نوع سبک دلبستگی است. سبکهای هویت در پژوهش حاضر از آزمون هویت شخصی (IsI) به منظور بررسی هویت دانش‌آموزان استفاده می گردد که دارای 32 سؤال می‌باشد که پاسخ‌های آن با مقیاس لیکرت است. بنابراین نمرات به دست آمده از این آزمون شاخص و تعریف عملیاتی هویت‌یابی در دانش‌آموزان است. کفایت اجتماعی در پژوهش حاضر برای اندازه گیری کفایت اجتماعی از پرسشنامه فلنر استفاده می گرددکه 47آیتم داردو چهار بعداز مهارت های شناختی ،مهارت های رفتاری کفایت هیجانی وآمایه ی انگیزشی را می سنجد. صل دوم ادبیات و پیشینه پژوهش کفایت اجتماعی: سازگاری اجتماعی کودکان، کانون تحقیقات گسترده ای در سالهای اخیر شده است این تمرکز نتیجه تحقیقی بنیادی می باشد که رابطه قوی بن کفایت اجتماعی اولیه و سازگاری زندگی آینده و رشد سالم را بیان می کند (کریک و داج ، 1994). اگر چه تعاریف بی شماری از کفایت اجتماعی در ادبیات وجود دارد، یک اتفاق نظر بارز در میان اکثر تعاریف منتشر شده وجود دارد که کفایت به موثر بودن در تعامل با دیگران شاره می کند که هم از دید خود شخص و هم از دید دیگران می تواند در نظر گرفته شود (رز - گراستور، 1997؛ سکرین، 2000). کفایت اجتماعی یک مفهوم قابل استفاده برای تنظیم و فراهم کردن انسجام ابعاد نسبتاً متمایز روابط دوستانه است. کفایت اجتماعی متشکل از گروهی از رفتارهای کلیدی بر اساس رشد بچه ها می باشد (گرونیگ، 1994). با توجه به زینس، الیاس، کرین برگ و ویسبرگ (2000)، کفایت اجتماعی شامل رفتارها و مهارت های اجتماعی، عاطفی و شناختی می باشد که بچه ها برای سازگاری موفق نیاز دارند. کفایت اجتماعی در چگونگی گذر سالم فردا از کودکی به بزرگسالی تنش اساسی دارد. برون مهارت های اجتماعی لازم، فرد در عرصه هایی از کار، مهارت های زندگی روزانه، زندگی مستقل و مشارکت در جامعه به دردسر می افتد. کار فرمایان اغلب ادعا می کنند که کفایت اجتماعی از تجربه واقعی در مکانهای کار مهم تر است. بچه هایی با اختلال هایی در کارکرد اجتماعی، رفتارهای ناسازگارانه زیادی (مانند عصبانیت، افسردگی)، طرد شدن از طرف همسالان و سازگاری اجتماعی ضعیف تر در زندگی آینده نشان می دهند. یکی از ویژگی های اصلی کفایت اجتماعی رشد و کاربرد مهارت های فرا اجتماعی است. مهارتهای فرا اجتماعی در ایجاد روابط اجتماعی سالم و مثبت مهم هستند (راینیکه، 1380). کفایت اجتماعی، تمرکز بر رفتارهای فرا اجتماعی سنجش کفایت اجتماعی معمولاً کیفیت هایی همچون مسئولیت پذیری، انعطاف پذیری همدلی و توجه، مهارتهای ارتباطی، شوخ طبعی و دیگر رفتارهای فرا اجتماعی را ارزیابی می کند. هنوز، تعریف کفایت اجتماعی مبهم می باشد. دلیل این ابهام به خاطر کاربرد متفاوت عباراتی مانند مهارتهای اجتماعی، مهارتهای زندگی، عزت نفس، مهارتهای بین فردی و کفایت اجتماعی در ادبیات پژوهشی است (سگرین، 2000). مدلی از کفایت اجتماعی که توسط فلنر و همکاران (1990) بیان شده، مفهوم نظام مندی از کفایت اجتماعی را فراهم کرده است. در این مدل، فلنر و همکارانش چهار گروه از مهارت ها و توانایی ها را معرفی می کنند که مولفه های اصلی کفایت اجتماعی را تشکیل می دهند. این مهارتها عبارتند از: 1) مهارتها و توانایی های شناختی 2) مهارتهای رفتاری 3) کفایت های هیجانی 4) آمایه های انگیزشی و انتظار. ویژگی عمده دیگر مدل از تعریف های اجتماعی کفایت اجتماعی حاصل می شود که بر اهمیت تبادیل یا تعامل های شخص - محیط به منظور فهم کفایت اجتماعی و مضامین انطباقی آن تاکید دارند. این وجه از مدل با میزان «تناسب» بین محتوا و شکل رفتارهایی که رخ می دهند و ویژگیهای زمینه هایی که در آنها موفقیت انطباقی انتظار می رود، ارتباط دارد. یک مضمون مهم ایندیدگاه این است که به هنگام قضاوت در خصوص کفایت یا کارآوری یک رفتار اجتماعی کودک یا نوجوان خاص باید نظم ها ترتیبات فرهنگی و بوم شناختی زمینه های رشدی را در نظر گرفت و ویژگی های عمده نهایی مدل به رابطه بین کفایت اجتماعی و بهداشت سازنده روانی مربوط میشود (رانییکه و همکاران، 1991). مهارت ها و توانایی شناختی: مهارت ها و توانایی های شناختی، به عنوان نخستین حوزه محوری مدل چهار بعدی، توجه نسبتا وسیعی را در ادبیات مربوط به کفایت اجتماعی دریافت کرده است. از عناصر اساسی در این حوزه، اکتساب دانش فرهنگی و اجتماعی است که کودکان باید برای عملکرد موثر در جامعه در جریان رشد و نیز به هنگام بزرگسالی، در اختیار داشته باشن (فلنر و همکاران، 1990). دریافت فایل رابطه سبک های دلبستگی و سبک های هویت با کفایت اجتماعی دانش آموزان دبیرستان

بررسی وضعیت آلودگی باغات پسته به نماتد مولد غده ریشه و تعیین گونه غالب ,شدت آلودگی و پراکنش آن در شهرستان سبزوار

بررسی وضعیت آلودگی باغات پسته به نماتد مولد غده ریشه و تعیین گونه غالب ,شدت آلودگی و پراکنش آن در شهرستان سبزوار چکیده به منظور تعیین دلایل ضعف و پژمردگی و کاهش رشد و زردی درختان پسته در سال‌های اخیر در باغات پسته شهرستان سبزوار، طی ماه‌های فروردین و تیر 1390 ، 40 نمونه از ریشه‌ها و خاک اطراف آن به طور تصادفی، از سراسر مناطق پسته‌خیز این شهرستان، جمع‌آوری شد.برای اثبات بیماری‌زایی و تکثیر نماتد، توده‌های تخم را از روی گره‌های ریشه آلوده به نماتد، جدا کرده و سپس رقم حساس گوجه‌فرنگی (رقم رد کلود) را با یک کیسه تخم، آلوده نموده و بعد از حدود 2 ماه، ماده بالغ از داخل گره‌های ایجاد شده روی ریشه‌ها، لاروهای سن دوم آن‌ها از داخل توده تخم و نرها ازخاک، جدا گردید.از انتهای بدن ماده بالغ (Perineal Pattern) برشی تهیه شد. بعد از تهیه اسلاید از برش‌های انتهای بدن ماده‌های بالغ، لاروسن دوم و نرها، اسلایدها با استفاده از کلید شناسایی Jepson 1987، از نظر خصوصیات مرفولوژیکی و مرفومتریکی مورد بررسی قرار گرفت.با توجه به مشخصات مرفولوژیک و مرفومتریک آن‌ها، گونه شناسایی شده در تمام نمونه‌های آلوده، Meloidogyne javanica بود که گونه غالب نماتد ریشه باغات پسته شهرستان سبزوار به شمار می‌رود.نقشه پراکنش و شدت آلودگی براساس نقاط جغرافیایی ثبت شده(GIS) نیز تهیه گردید. فهرست مطالب عنوان صفحه چکیده 1 مقدمه 2 فصل اول: کلیات 1-1- مشخصات جغرافیایی و آب و هوایی منطقه 5 1-1-1- موقعیت جغرافیایی شهرستان سبزوار 5 1-2- مشخصات میزبان 8 1-2-1- پیشینه درخت پسته 8 1-2-2- ویژگی‌های گیاهشناسی و گونه‌های مهم پسته 8 1-2-3- مشخصات گل نر و ماده درخت پسته 10 1-2-4- ارقام پسته  11 1-2-5- نیازهای آب و هوایی پسته 12 1-2-6- فنولوژی فصلی درخت پسته 12 1-2-7- ارزش غذایی پسته 13 1-2-8- تولید جهانی پسته و بررسی روند تغییرات آن .......................................................... 14 1-2-9- سطح زیر کشت پسته در جهان و بررسی روند تغییرات آن............................................ 15 1-2-10- صادرات جهانی پسته ............................................................................................. 16 1-2-11- سطح، میزان تولید و عملکرد پسته کشور .................................................................. 17 1-3- مشخصات بیمارگر ............................................................................................................... 21 1-3-1- تاریخچه نماتد شناسی ............................................................................................... 21 1-3-2- مشخصات راسته…………….. Tylenchida(Orley,1880)........................... 22 1-3-3- جایگاه نماتد ریشه گرهی ........................................................................................... 22 1-3-4- مشخصات کلی نماتد ریشه گرهیMeloidogyne ................................................... 23 1-3-5- تشخیص گونه‌های جنسMeloidegyne .................................................................. 24 1-3-5-1- نماتد……………. M.javanica. Treub (Chitwood).................. 27 1-3-5-2- نماتد M. incognita (Kofoid & white) Chifwood ......................... 27 1-3-5-3- نماتد M. arenaria (Neal) chitwood ............................................. ... 27 1-3-5-4- نماتد chitwood M.hapla ................................................................ 27 1-3-6- دامنه‌ی میزبانی نماتد ریشه گرهی 28 1-3-7- علائم خسارت نماتد ریشه گرهی 28 1-3-8- زیست شناسی و چرخه‌ی زندگی نماتد ریشه گرهی 29 1-3-9- پیشگیری و کنترل نماتد ریشه گرهی ......................................................................... 32 1-3-9-1- اقدامات زراعی .................................................................................... ..... 32 1-3-9-2- استفاده از ارقام مقاوم 33 1-3-9-3- کنترل شیمیایی 33 1-3-9-4- کنترل بیولوژیکی 34 فصل دوم: مروری بر مطالعات انجام شده 2-1- تاریخچه نماتد ریشه گرهی در جهان .................................................................................. 39 2ـ2ـ تاریخچه نماتد ریشه گرهی در ایران 41 2-3- نماتدهای انگل درخت پسته ............................................................................................... 43 فصل سوم: مواد و روشها 3-1- نمونه‌برداری  46 3-2- تکثیر نماتد ریشه گرهی ، خا لص سازی و اثبات بیماری‌زایی................................................ 48 3-3- تهیه برش از شبکه کوتیکولی انتهای بدن نماتدهای ماده .......................................................... 50 3-4-رنگ آمیزی نماتد ماده و تخم های درون کیسه تخم.............................................................. 52 3-4-1- رنگ آمیزی نماتد ماده .............................................................................................. 52 3-4-2- رنگ آمیزی تخم درون کیسه تخم .............................................................................. 52 3-5- جداسازی نماتدهای نر از خاک ....................................................................................... . 52 3-6- تهیه لاروهای سن دوم ....................................................................................................... 54 3-7- تهیه اسلایدهای میکروسکوپی از نماتدها 54 3-7-1- تهیه اسلاید موقت 54 3-7-2- تهیه اسلاید دائمی 54 3-8-تعیین شدت آلودگی بر اساس تعداد گال در پنج گرم ریشه پسته.......................................... 56 فصل چهارم: نتایج و بحث 4-1- نتایج  58 4-1-1- شناسایی گونه‌های نماتد مولد غده ریشه پسته 58 4-1-2- مشخصات جنس Meloidogyne Goeldi,1892 59 4-1-2-1- مشخصات ماده 59 4-1-2-2- مشخصات نر 64 4-1-2-3- مشخصات لارو سن دوم ............................................................................ 67 4-1-3- تعیین نقاط جغرافیایی ایزوله های جمع آوری شده و گونه نماتد شناسایی شده...... 68 4-1-4- میزان شدت آلودگی بر اساس شمارش شاخص گال در 5 گرم ریشه پسته و پراکنش شدت آلودگی.............. 71 4-2- بحث  77 فصل پنجم: منابع منابع ........................................................................................................................... 80 خلاصه انگلیسی ............................................................................................................... 89 فهرست جداول عنوان صفحه جدول 1-1- متوسط بارندگی ماهانه وسالانه درایستگاه سینوپتیک سبزوار (1384– 1333) . . . . . . . . . 7 جدول 1-2- پارامترهای آنا لیز شده دما در ایستگاه سینوپتیک سبزوار (1384– 1333) . . . . . . . . . .. . 7 جدول 1-3- مواد و عناصر موجود در 100 گرم مغز پسته . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . ...................... 13 جدول1-4 - تولید پسته در جهان و کشورهای عمده تولید کننده طی سالهای 2007-1997 ............. 14 جدول1-5- سهم کشورهای عمده تولید کننده از تولید جهانی .............................................................. 15 جدول 1-6- سطح زیر کشت پسته در جهان و کشورهای منتخب طی سالهای 2007 ـ 1997 . . . . . . . . . . 15 جدول 1-7- سهم کشورهای منتخب از سطح زیر کشت جهانی ............................................................ 16 جدول 1-8- میزان صادرات پسته در جهان و کشورهای عمده صادرکننده طی سالهای 2006 -1997..... 16 جدول 1-9- سطح زیرکشت، میزان تولید و عملکرد پسته کشور به تفکیک استان در سال 1387................. 18 جدول 1-10- آمار سطح زیرکشت، میزان تولید و عملکرد محصول پسته آبی سال 1388 . . . . . ......... 20 جدول 1-11 - آمار سطح زیر کشت تولید و عملکرد محصولات دایمی شهرستان سبزوار در سال1390.... 21 جدول 1-12- گونه مهم نماتد ریشه گرهی و درصد پراکندگی آن ..................................................... 23 جدول1-13- عکس العمل گونه‌ها و نژادهای نماتد ریشه گرهی در برابر میزبانهای افتراقی ............... 26 جدول 1-14- آنزیمهای مترشحه توسط نماتدها پارازیت گیاهی ...................................................... 31 جدول 3-1-درجه بندی اندکس گال براساس تعداد گال ................................................................ 56 جدول 4-1- مشخصات مورفومتریک 20 نمونه نماتد ماده M . javanica در 10 نمونه مورد آزمون ...................... 6 جدول 4-2- مشخصات مشخصات مورفومتریک20 نمونه نماتد نر M . javanica در 10 نمونه مورد آزمون......... 66 جدول 4-3- مشخصات مورفومتریک 20 نمونه لارو سن دو M . javanica در 10 نمونه مورد آزمون....... ........ 67 جدول 4-4- نقاط جغرافیایی و شناسایی گونه Meloidogyne spp ایزوله‌های بدست آمده ........... 68 از نمونه‌های ریشه و خاک پسته در شهرستان سبزوار جدول 4-5: میزان شدت آلودگی بر اساس تعداد گال در پنج گرم ریشه پسته ................................ 71 فهرست تصاویر عنوان صفحه تصویر1-1- موقعیت منطقه مورد پژوهش در کشور و استان خراسان رضوی ............................... 6 تصویر 1-2- تصاویر گل نر و گل ماده ......................................................................................... 11 تصویر1-3-اشکال ارقام پسته . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . .. . . . . . .............. 11 تصویر 1-4: نماتد نر و ماده ......................................................................................................... 24 تصویر1-5- شکل سر و استایلت نماتد نر . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . 25 تصویر 1-6- شکل کلی از شبکه کوتیکولی انتهای بدن نماتد ماده . . . . . . . . . . . . . . . . . . ..... 26 تصویر 1-7- شکل انتهای دم در لارو سن دوم ............................................................................. 26 تصویر 1-8 - علائم خسارت نماتد ریشه‌گرهی بر روی درخت پسته ......................................... 29 تصویر1-9- مراحل تشکیل لارو سن دوم ................................................................................... 30 تصویر1-10- سیکل زندگی نماتد ریشه گرهی ............................................................................ 31 تصویر 1-11- تصاویری از سلولهای غول‌آسا ............................................................................ 32 تصویر1-12- تاثیر مستقیم قارچ Trichoderma hazianum روی نماتد Meloidogyne javanica36 تصویر 1-13- تصاویر میکروسکوپی از لارو سن 2 آلوده به باکتری Pasteuria penetrans ........... 36 تصویر 1-114- میوه های تازه وزرد رنگ و میوه های خشک و قهوه ای رنگ چریش . . . . .............. 37 تصویر 3-1- مراحل نمونه برداری خاک و ریشه پسته . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. ......... 48 تصویر3-2- تعیین نقاط جغرافیایی نمونه برداری شده ................................................................. 48 تصویر 3-3- مراحل جداسازی کیسه تخم نماتد از ریشه پسته ..................................................... 49 تصویر 3-4- علائم آلودگی به نماتد در بوته های گوجه فرنگی و ایجاد گال برروی ریشه بوته های گوجه فرنگی. . . . . . 50 تصویر 3-5- مراحل تهیه شبکه کوتیکولی انتهای بدن نماتد ماده از ریشه آلوده گوجه فرنگی . . . 52 تصویر4-1- برش انتهای بدن نماتد ماده بالغM.javanicaجدا شده از باغات پسته شهرستان سبزوار ........................... 61 تصویر4-2- ماده بالغ نماتد M. javanica. سر و مری در نماتد بالغ ماده ................................... 62 تصویر4-3- تصویر میکروسکوپی از انتهای بدن نماتد ماده بالغ M. javanica از باغات پسته شهرستان سبزوار ............. 63 تصویر 4-4- تصاویر میکروسکوپی از نماتد ماده بالغ M. javanicaاز باغات پسته شهرستان سبزوار ........................ 64 تصویر4-5- قسمتهای مختلف نماتدنر ولارو سن2 M . javanica،جدا شده از باغات پسته شهرستان سبزوار.............. 66 فهرست نقشه ها عنوان صفحه مقدمه پسته (Pistacia vera L.) متعلق به تیره سماق (Anacardiaceae) است. جنس Pistaciaدارای 11 گونه است که همگی آن‌ها از خود تربانتین یا سقز ترشح می‌کنند. گیاهان این تیره به صورت درخت یا درختچه هستند (پناهی و همکاران، 1381). سرزمین ایران قرن‌ها بدون رقیب عمده‌ترین تولیدکننده پسته جهان بوده است ولی در حال حاضر کشورهای دیگری در زمینه تولید و تجارت پسته به رقابت با ایران پرداخته‌اند (ابریشمی، 1373). تولید پسته در ایران یکی از منابع مهم ایجاد درآمد برای باغداران پسته و اقتصاد ملی محسوب می‌شود. در سال 1390 تقریباً 3/3درصد از ارزش صادرات غیرنفتی کشور را، صادرات پسته تشکیل می‌دهد که درآمد ارزی حاصل از آن سالانه حدود 4 میلیارد دلار گزارش شده است (اتاق بازرگانی،1390). تقریباً 30 بیماری برای پسته در جهان گزارش شده است. خاک منشأ بیماری‌هایی مخصوصاً گموز، پژمردگی ورتسلیومی و نماتد مولد غده ریشه Meloidogyne است که بیماری در پسته ایجاد نموده و از بیماری‌های مهم پسته در جهان است (1991,.Ogawa et al). نماتدهای انگل گیاهی یکی از عوامل بازدارندة رشد محصولات زراعی و باغی بوده و خسارت‌های ناشی از آن‌ها بر محصولات اساسی و محصولات مهم اقتصادی به ترتیب بالغ بر 7/10% و 14% بوده که این خسارات بالغ بر یکصد میلیارد دلار آمریکا در سال 1984 در جهان تخمین زده شده است (, 1987 Sasser and Freckman). در ایران اولین‌بار نماتدهای مولد غده ریشه در باغات پسته از رفسنجان در سال 1345 توسط صامت شناسایی شده است (فریور مهین،1365). نماتد مولد غده ریشه می تواند علاوه بر ایجاد بی‌نظمی در جذب و انتقال آب و مواد مغذی توسط گیاه، باعث ایجاد استرس در گیاهان نیز می‌شود. تلقیح نماتد مولد غده ریشه در بادمجان، بدون استرس رطوبتی، باعث ایجاد کلروز و کاهش سنتر رنگدانه‌ها می‌شود( et al., 2009Shaukat). علاوه بر این، اثرات متقابل دوپاتوژن قارچ عامل پژمردگی Fusarium oxysporum و نماتد مولد غده ریشه Meloidogyne incognita باعث می‌شود که خسارات وارده بر گیاه، بیشتر از مجموع خساراتی که هر یک از این عوامل بیماری‌زا جداگانه وارد می‌سازند، بوده است. به عبارتی نماتد باعث شکسته شدن مقاومت گیاه به قارچ، عامل پژمردگی می‌شود (حسینی‌نژاد و واجد خان، 1379). با توجه به اینکه استان خراسان رضوی و شهرستان سبزوار از تولیدکنندگان مهم پسته در ایران است و بتازگی در باغات پسته ضعف و خشکی در درختان مشاهده شده است، سعی در این است که به این حقیقت برسیم که آیا دلیل ضعف درختان پسته، نماتد مولد غده ریشه است و گونه غالب نماتد ریشه گرهی و شدت آلودگی و پراکنش گونة غالب در شهرستان سبزوار را تعیین نماییم. فصل اول کلیات 1-1-مشخصات جغرافیایی و آب و هوایی منطقه 1-1-1-موقعیت جغرافیایی شهرستان سبزوار منطقه مورد پژوهش در طول جغرافیایی 57 درجه، ‏‏40 دقیقه و 30 ثانیه شرقی و 45 درجه، 20 دقیقه و 40 ثانیه عرض شمالی قرار دارد. مساحت ‏ این محدوده 20502 کیلو متر مربع است که 80/1 وسعت کشور را در بر می گیرد (تصویر 1-1).‏ آب و هوای منطقه ی تحقیق به علت وجود ارتفاعات و همچنین مجاورت با کویر، متنوع ‏و به واسطه قرار گرفتن در سه جلگه ی موازی با ارتفاعات و کویر، میزان بارندگی و ‏پراکنش آن نیز متغیر است. وجود شرایط فوق و دیگر شرایط اقلیمی باعث گردیده ‏است که این شهرستان از هر دو نوع قنات دشتی و کوهستانی با پراکنش متنوع محیطی برخوردار باشد. ‏ مطالعات انجام گرفته‎ نشان می‌دهد که متوسط سالیانه بارندگی در منطقه مورد ‏پژوهش 6/209 میلی‌متر است که از 150 میلی متر در مناطق خشک تا 280 میلی متر در ‏مناطق کوهستانی متغیر است. ‏ همچنین مطالعات آنالیز باد منطقه، بیانگر شرقی بودن باد غالب است که به ‏ترتیب 42/17، 62/32، 08/17 و 49/10 درصد از مجموع باد‌های بهار، تابستان، پاییز و ‏زمستان منطقه را به خود اختصاص داده است(جدول1-1)(جدول 1-2) (دادرسی سبزوار، 1383)‎‏.‏ سالانه اسفند بهمن دی آذر آبان مهر شهریور مرداد تیر خرداد اردیبهشت فروردین   189 6/38 2/29 6/31 8/25 4/12 8/5 7/0 5/0 2/1 5/2 8/13 9/26 متوسط بارندگی (mm) جدول 1-2: پارامترهای آنا لیز شده دما در ایستگاه سینوپتیک سبزوار (1384– 1333   فروردین اردیبهشت خرداد تیر مرداد شهریور مهر آبان آذر دی بهمن اسفند سالانه میانگین متوسط درجه حرارت روزانه درجه سانتی گراد)) 9/17 6/23 1/29 1/31 6/29 25 2/18 11 4/5 1/3 8/9 11 61/17 میانگین حداقل دمای روزانه( درجه سانتی گراد) 11 9/15 8/20 2/23 1/21 6/16 5/10 6/4 3/0 6/1- 3/0 8/4 6/10 میانگین حداکثر دمای روزانه( درجه سانتی گراد) 5/24 3/30 7/35 7/37 4/36 7/32 8/25 1/18 5/11 8/8 9/11 2/17 23/24 1-2- مشخصات میزبان 1-2-1- پیشینه درخت پسته از خاستگاه‌های اولیه درختان پسته می‌توان به ایران، افغانستان، ترکمنستان، سوریه و فلسطین اشاره کرد. پاره‌ای از منابع نیز، سواحل مدیترانه و خصوصاً کرانه‌های شرقی این دریا را، مبدأ نخستین درختان پسته معرفی کرده‌اند. به طور کلی سرزمین‌های فوق در قارة آسیا و در فاصلة بین کرانة رود جیحون (در شرق) تا سواحل دریای مدیترانه (در غرب)، به مسافت حدود 6000 کیلومتر، قرار گرفته و بین 32 تا 40 درجه عرض شمالی، واقع شده‌اند. پرورش درختان پسته برای نخستین بار در نواحی غربی خراسان صورت گرفته است، این اقدام در عصر پارت‌ها تا اوایل دوره ساسانیان، در نواحی مستعد ایالت پارت (خراسان)، در حد فاصلة شرق و جنوب غربی گرگان تا ناحیة سبزوار و از سبزوار به جانب مناطق جنوبی نیشابور تا ناحیة قهستان، انجام پذیرفته است (علوی، 1378). پسته در آغاز عصر مسیحیت، ابتدا به حوزة مدیترانه و سپس در سال 1856 به اروپا و در سال 1890 به کالیفرنیا رسیده است و در سال 1904 اولین درخت آن در ایستگاه تحقیقاتی «چیکو» کاشته شده است (درویشیان، 1378). بقایایی از پسته‌زارهای انبوه سبزوار تا اواخر قرن ششم برجای بوده، زیرا ابوالحسن بیهقی تأکید کرده که در زمان او، درختان پسته در دیه‌های جلین و ایزی و نوقاریز مرغوب و معروف بوده است (ابریشمی، 1373). شاید کهن‌ترین سند درباره پیشینة تاریخی کشت پسته در ایران را بتوان سفرنامة هرودت، تاریخ‌دان نامی یونانی، دانست (محمدخانی، 1376). 1-2-2- ویژگی‌های گیاهشناسی و گونه‌های مهم پسته واژة «پیستاسیا» که همان جنس پسته است از نام فارسی آن یعنی پسته برگرفته شده است. درخت پسته اهلی ( Pistacia vera) گیاهی نیمه گرمسیری، وابسته به تیرة سماقAnacardiaceaeیا تیره پسته، ازگیاهان دولپه‌ای و جدا گلبرگان است . جنس پسته دارای 11گونه است که گونه‌هایی از آن‌ها از خود، تربانتین یا سقز ترشح می‌کنند (پناهی و همکاران، 1381). گیاهان این تیره به صورت درخت یا درختچه‌ای است.این تیره از 75جنس و 600 گونه تشکیل یافته که بیشتر در مناطق بین استوایی و معتدله پراکنده است (ابریشمی، 1373 و اسماعیل‌پور، 1383). مهمترین گونه‌های درختان پسته به شرح زیر است: Pistacia vera P. integerrima P. khinjuk P. lentiscus P. mutica P. chinensis P. atlantica P. terebinthus P. mexicana P. oleosa این گیاهان دو پایه، خزان‌کننده (گونه‌های موجود در ایران)، دارای برگهای مرکب 5-3 برگچه‌ای، بدون گوشوارک می‌باشند (اسماعیل‌پور، 1383). درخت پسته دارای برگهای شانه‌ای مرکب است و هر برگ یک جوانه جانبی را دربرمی‌گیرد. اکثر جوانه‌های جانبی به گل آذین اولیه مبدل می‌شوند و یک محور اصلی را تشکیل می‌دهند که در سال بعد، محل تولید خوشه‌های پسته خواهد بود. بنابراین خوشه‌های پسته به صورت جانبی بر روی چوب یکساله می‌رویند (راد، 1374 و محمدخانی، 1376 و علوی، 1378). از نظر گیاهشناسی میوه پسته، در ردیف میوه‌های شفت گروهبندی می‌شود. میوه‌های شفت متشکل از سه قسمت لایه برونبر خارجی (Exo carp)، لایة میانبر گوشتی (Meso Carp) و لایة درونبر سخت (Endo carp) هستند که درونبر، هسته را می‌پوشاند. تفاوت میوه‌های شفت در بخش خوراکی آن‌هاست. در پسته و بادام هسته به خوراکی می‌رسد، در حالی که در سایر میوه‌جات، هسته سخت است و میانبر گوشتی به عنوان بخش مأکول، مورد استفاده قرار می‌گیرد (پناهی و همکاران، 1381 و صداقتی و همکاران، 1389). درخت پسته دو پایه است، یعنی برای تولید میوه به وجود هر دو درخت نر و ماده نیاز است. گل درخت ماده فاقد گلبرگ و غده‌های شهدساز بوده، بنابراین زنبورهای عسل را به خود جلب نمی‌کند. گرده گل توسط باد پراکنده می‌شود (پناهی و همکاران، 1381). درخت پسته برگریز است، بدین معنا که در پاییز خزان نموده و زمستان را در خواب می‌گذراند. ریشه‌زایی درخت به طریقة عمقی انجام می‌شود. سیستم ریشه‌ای پیچیده و انبوه، درخت را قادر می‌سازد تا به عمق خاک نفوذ کرده و از مواد موجود آن بخوبی تغذیه نماید. از این رو درختان پسته قابلیت سازش‌پذیری با دوره‌های طولانی کم‌آبی را دارد (پناهی و همکاران، 1381 و صداقتی و همکاران، 1389). بنابراین پسته گیاهی پایدار به خشکی و شوری آب و خاک است (سمیع و همکاران، 1381). 1-2-3- مشخصات گل نر و ماده درخت پسته مشخصات گل نر: درخت نر در فروردین ماه (دو تا سه روز زودتر از درخت ماده) به گل می‌نشیند. گل‌ها به صورت خوشه‌ای و هر خوشه به صورت توده‌ای از گل متراکم (تقریباً کروی مایل به بیضی) است. بر روی خوشه از هر نقطه چند گل ظاهر می‌شود. گلها بدون گلبرگ و کاسبرگ حقیقی هستند. هر گل نر مشتمل بر 5 پرچم بیضی شکل با میلة کوتاه سبز رنگ است. هر خوشه تعداد زیادی گل نر دارد (ابریشمی، 1373 و پناهی و همکاران، 1381). مشخصات گل ماده: گل ماده نیز خوشه‌ای است با این تفاوت که طرز قرار گرفتن گل‌ها بر روی خوشه، منفرد و با فاصله از یکدیگر است و انبوهی و تراکم گل نر را بر روی خوشه ندارد و هر گل ماده مشتمل بر یک تخمدان و متصل به خامة کوتاه است، خامه به کلاله سه شاخه مخصوصی ختم می‌شود. گل‌های ماده نیز ابتدا سبز رنگ است، این وضع تا دو روز بعد ادامه دارد، اگر در این فاصله دانة گرده گل نر به آن نرسد و به اصطلاح عمل لقاح (باروری) انجام نگیرد، رنگ کلاله قرمز مایل به قهوه‌ای می‌شود و سپس خشک شده و می‌ریزد. اما در صورتی که دانه گرده گلهای نر، به موقع به گل‌های ماده برسد، دانه‌های گرده بر روی کلاله می‌چسبد و از آنجا از گلوگاه خامه گذشته، وارد تخمدان می‌شود. در تخمدان عمل لقاح انجام می‌گیرد. در صورت تلقیح، خوشه‌های گل ماده شروع به رشد کرده و دانه‌های آن به تدریج بزرگ می‌شود. پوست نرم خارجی دانه‌ها در حین رشد، رنگهای سبز و صورتی آمیخته به زرد و بنفش کمرنگ، به خود می‌گیرد(تصویر1-2) (ابریشمی، 1373 و پناهی و همکاران، 1381). 1-2-6- فنولوژی فصلی درخت پسته جوانه‌های گل روی شاخه‌های یکساله در اوایل فروردین شروع به متورم شدن می‌کنند. در طول نیمه دوم فروردین، 100 تا 200 گل در هر خوشه گل گرده‌افشانی می‌شود. از اواسط فروردین تا اوایل خرداد، پوست استخوانی (درون بر) شکل می‌گیرد. اما بذر هیچ‌گونه رشدی ندارد. در طول این دوره پوست استخوانی، نرم و آسیب‌پذیر به حمله حشرات بوده و در اثر بارش باران شکاف برمی‌دارد. در اواسط خرداد، پوست استخوانی سخت می‌شود.از اوایل تیر ماه، مغز شروع به رشد کرده تا اواسط مرداد پوست استخوانی را پر می کند. در اوایل تا اواسط شهریور، میوه ها شروع به رسیدن می کنند.سپس پوست استخوانی خندان می شود. پوست سبز شروع به اضمحلال نموده و ریزش بعضی از میوه‌ها، از محور خوشه شروع می‌شود. رشد شاخ و برگ همزمان با رشد پوست استخوانی می‌باشد. رشد رویشی در ماه فروردین شروع شده و در اواسط خرداد پایان می‌یابد. رویش جدید برگهای شانه‌ای مرکب همراه با جوانه‌های گل جانبی در محور برگ و یک جوانه رویشی انتهایی تولید می‌کند. جوانه‌ها از اواسط فروردین ماه تا اواخر خرداد تمایز یافته و در ماه تیر، مرداد و شهریور راکد هستند و مجدداً در اواخر ماه مهر، تمایز ادامه می‌یابد. بعضی اوقات جهش رشدی شاخ و برگ در اوایل تیرماه، مشاهده می‌شود. برخلاف جهش رشدی بهاره که جوانه‌های گل تولید می‌کند، این رشد، دارای جوانه‌های رویشی جانبی اولیه است. در ماه‌های مرداد و شهریور، برگهای نزدیک به خوشه میوه، اغلب حالت تهی شدن از مواد غذایی و پیری را نشان می‌دهند. بیشتر برگها در اوایل آذر ریزش می‌کند و درخت تا اواخر اسفند در حالت رکود باقی می‌ماند (صداقتی و همکاران، 1389). دریافت فایل بررسی وضعیت آلودگی باغات پسته به نماتد مولد غده ریشه و تعیین گونه غالب ,شدت آلودگی و پراکنش آن در شهرستان سبزوار

پاورپوینت درباره رشد و نمو

پاورپوینت درباره رشد و نمو لینک دانلود و خرید پایین توضیحات دسته بندی : PowerPoint نوع فایل : .ppt ( قابل ویرایش و آماده پرینت ) تعداد اسلاید : 31 اسلاید رشد: افزایش تعداد وحجم سلولها نمو: تولید مثل وظهوراندامهای زایشی اشکال مختلف رشد حالت اول مریستم ثانویه افزایش تعداد سلول مریستم اولیه دریافت فایل پاورپوینت درباره رشد و نمو

تحقیق پاورپوینت هفت عادت مردمان موثر

تحقیق پاورپوینت هفت عادت مردمان موثر لینک دانلود و خرید پایین توضیحات دسته بندی : PowerPoint نوع فایل : .ppt ( قابل ویرایش و آماده پرینت ) تعداد اسلاید : 31اسلاید عا د ت ا ول عامل باشید اصول نگرش شخصی رفتارما کنش تصمیم ها ی ماست نه زاییده شرایط ما. پس می توانیم بگذاریم احساس ها تابع ارزشها با شند . حلقه نگرانی / حلقه نفوذ عادت دوم ذهن ازپایان آغازکنید اصول رهبری شخصی ابعاد پنجگانه برند دریافت فایل تحقیق پاورپوینت هفت عادت مردمان موثر

توسعه تست آویدیته الایزا با استفاده از پروتئینهای نوترکیب برای تمایز عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسما

توسعه تست آویدیته الایزا با استفاده از پروتئینهای نوترکیب برای تمایز عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسما فهرست مطالب عنوان صفحه چکیده 1 مقدمه 3 فصل اول: کلیات 1-1- اتصال ونفوذ توکسوپلاسما گوندی به سلول 12 1-2-راه انتقال 13 1-2-1-مصرف مواد انگل آلوده به اووسیست 14 1-2-2-مصرف گوشت حاوی کیست نسجی 15 1-2-3-انتقال از طریق جفت 15 1-3- همه گیر شناسی عفونت توکسوپلاسمایی 16 1-3-1-عوامل موثر در همه گیر شناسی توکسوپلاسما گوندی 18 1-3-1-1-عوامل مربوط به انگل 18 1-3-1-2-عوامل مربوط به میزبان 18 1-3-1-3-عوامل مربوط به محیط 19 1-4-آنتی ژنهای توکسوپلاسما گوندی 19 1-5-واکسیناسیون 21 1-6-بیماریزایی 22 1-7-توکسوپلاسموزیس مادرزادی 24 1-8-تظاهرات بالینی 25 1-9-تشخیص توکسوپلاسموز 29 1-9-1- تشخیص مستقیم 29 1-9-1-1-تشخیص هیستولوژی (بافت شناسی 29 1-9-1-2- جداسازی توکسوپلاسما گوندی 30 1-9-1-3-تکنیک واکنش زنجیری پلیمراز (PCR1-15-2-تشخیص غیر مستقیم 30 1-9-2-تشخیص غیر مستقیم ..................................................................................................................... 31 1-9-2-1- تست رنگی سابین – فلدمن 34 1-9-2-2- سنجش آنتی بادی فلوئورسنت غیر مستقیم 34 1-9-2-3- تست سنجش آگلوتیناسین ایمنوسوربنت 35 1-10-الایزا (ELISA) 35 1-10-1- الایزای مستقیم 36 1-10-2- الایزای غیر مستقیم 36 1-10-3- الایزای ساندویچ 37 1-10-3-1-الایزای ساندویچ مستقیم 37 1-10-3-2-الایزای ساندویچ غیر مستقیم 37 1-10-4- الایزای رقابتی یا مهاری 37 1-11-کاربرد پروتئین های نوترکیب در تشخیص توکسوپلاسماَ 38 1-12-تولید پروتئین نوترکیب 39 1-13-تشخیص سرولوژی توکسوپلاسموزیس در دوران حاملگی 39 1-14-ارزش تشخیصی ایزوتایپ های مختلف ایمونوگلوبولین اختصاصی توکسوپلاسما در تشخیص عفونت 40 1-15-کاربرد IgGAvidity در افتراق عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسموزیس 42 1-16-درمان 44 1-17-پیشگیری 47 1-18- بیان مسئله و اهمیت آن 48 1-19- دلایل انتخاب موضوع 50 1-20-اهداف و فرضیا ت 51 فصل دوم: مروری بر تحقیقات گذشته 2-1- مروری بر تحقیقات گذشته 53 فصل سوم: مواد و روشها 3-1- تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی 59 3-1-1-مکانیسم تخلیص پروتئین با روش کروماتوگرافی تمایلی 59 3-1-2- تهیه و تخلیص پروتئین های نو ترکیب rGRA7 (pUET-GRA7) و rGRA6(PUET-GRA6 60 3-2- بررسی و تائید پروتئین های تخلیص شده 62 3-2-1- بررسی و تائید پروتئین های نوترکیب GRA7 و GRA6 بوسیله آنالیز SDS-PAGE 62 3-2-2- تائید هویت پروتئین بیان شده با روش وسترن بلات 66 3-3- دیالیز نمونه های تخلیص شده 71 3-4- تعیین غلظت پروتئین 71 3-5- سیستم های الایزا(اصول کار) 71 3-5-1- طراحی سیستم های الایزا 72 3-5-1-1- نکات تکنیکی در الایزا 72 3-5-1-2- برخی مشکلات در الایزا 74 3-6- بررسی پتانسیل PUET-GRA7 و PUET-GRA6 در تشخیص عفونت حاد و مزمن توکسوپلاسموز با روش الایزا 76 3-6-1-برقراری شرایط الایزا 76 3-6-2- استفاده از لیزات باکتری در الایزا 76 3-7- اندازه گیری میزان آنتی بادی به روش الایزای غیر مستقیم 77 3-8-تعیین Cut off در روش الایزا 80 3-9- اندازه گیری میزان آنتی بادی IgG با کیت تجاری Euroimmun 81 3-10- اندازه گیری میزان آنتی بادی IgM با کیت تجاری Euroimmun 82 3-11- برقراری شرایط بهینه به منظور محاسبه Avidity Index IgG 82 3-12- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از پروتئین های نوترکیب PUET-GRA7 و PUET-GRA6 83 3-13- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از کیت تجاری EUROIMMUN 83 3-14- اندازه گیری IgG Avidity Index با استفاده از کیت تجاری Microgen 85 3-15- محاسبه اندکس اویدیته نسبی (RAI) Relative avidity Index 88 3-16- کنترل کیفی 88 3-16-1- حساسیت 88 3-17-طراحی تحقیق 88 3-18- تعداد نمونه و روش نمونه گیری 89 3-18-1- تعداد نمونه 89 3-18-2- روش نمونه گیری 89 فصل چهارم: نتایج آزمایشات 4-1 :تهیه و تخلیص پروتئین های نو ترکیب rGRA7 (pUET-GRA7 و rGRA6 (PUET-GRA6 92 4-2- تایید هویت پروتئین های تخلیص شده با روش وسترن بلات 93 4-3- بررسیIgG,IgM,IgG Avidity نمونه های سرمی با کیت استاندارد Euroimmun 94 4-3-1- نتیجه آزمایشات IgG ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرمهای ایرانی با کیت Euroimmun.. . 95 4-3-2- نتیجه آزمایشات IgM ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرمهای با کیت Euroimmun 95 4-3-3-نتیجه آزمایشات IgG Avidity ELISA مخصوص توکسوپلاسما سرم ها با کیت Euroimmun 96 4-4- برقراری شرایط ELISA Avidity با پروتئین های نوترکیب 100 4-5- نتایج آزمایش Avidity ELISA با استفاده از پروتئین نوترکیب GRA6 برای تمایز عفونت حاد ومزمن در سرم های زنان باردار 103 4-6- نتایج آزمایش Avidity ELISA با استفاده از پروتئین نوترکیب GRA7 برای تمایز عفونت حاد ومزمن در سرم های زنان باردار ایران 103 4-7- بررسی نتایج ناهمخوان بین الایزا اویدیته با پروتئین های GRA6 وGRA7 و کیت Euroimmun با استفاده از کیت Microgen 104 فصل پنجم:بحث، پیشنهادات منابع 121 خلاصه انگلیسی 127 ضمائم 129 فهرست جداول عنوان صفحه جدول3-1: جدول ارزیابی اویدیتی در کیت میکروژن 87 جدول 4-1: نتایج آزمایشات Avidity ELISA,IgG,IgM سرم ها با کیت Euroimmon 97 جدول 4-2: بررسی نتایج ناهم خوان با کیت های Microgen,Euroimmun و پروتئین های GRA6 وGRA7 106 جدول شماره 4-3: نتایج آزمایش IgG وIgG Avidity با پروتئین های GRA6 و GRA7 بر روی سرم های زنان باردار ............................................................................................................... 108 فهرست شکل ها عنوان صفحه شکل1-1- شکل شماتیک یک تاکی زوایت و یک برادی زوایت توکسوپلاسما گوندی 4 شکل1-2- عکس میکروسکوپ الکترونی یک تاکی زوایت، سوش VEGکه در حال نفوذ به یک نوتروفیل صفاق موش می باشد 7 شکل1-3- عکس میکروسکوپ الکترونی از تاکی زوایت سوش VEG در حال تقسیم اندودیوژنی داخل ماکروفاژ صفاق موش 8 شکل1-4- یک کیست بافتی توکسوپلاسما که حاوی بیش از هزار برادی زوایت می باشد 9 شکل 1-5- راه های انتقال انگل توکسوپلاسما گوندی در میزبان اصلی و حد واسط 16 شکل 1-6- دختری با هیدروانسفالی بعلت توکسوپلاسموز مادرزادی 25 شکل 1-7- شکل شماتیک انواع الایزا............................................................................................... 38 شکل3-1:نوارهای کیت میکروژن............................................................................... 87 شکل 4-1 : تخلیص پروتئین GRA6 به روش کروماتوگرافی تمایلی 92 شکل 4-2: تخلیص پروتئین GRA7 به روش کروماتوگرافی تمایلی 93 شکل 4-3: بررسی هویت آنتی ژنیسته پروتئین های GRA6 وGRA7 تخلیص شده باروش وسترن بلات 94 شکل 4-4 : تعیین غلظت بهینه اوره برای تفکیک سرمهای فاز حاد از مزمن عفونت توکسوپلاسما در آویدیته الایزا با استفاده از پروتئین GRA6 101 شکل 4-5 : تعیین زمان بهینه شستشو با محلول اوره به منظور تفکیک سرم های فاز حاد از مزمن عفونت توکسوپلاسما در آویدیته الایزا با استفاده از پروتئین GRA6 101 شکل 4-6 : تعیین غلظت بهینه اوره برای تفکیک سرمهای فاز حاد از مزمن عفونت توکسوپلاسما در آویدیته الایزا با استفاده از پروتئین GRA7 102 شکل 4-7 : تعیین زمان بهینه شستشو با محلول اوره به منظور تفکیک سرم های فاز حاد از مزمن عفونت توکسوپلاسما در آویدیته الایزا با استفاده از پروتئین GRA7 102 شکل4-8: مدلی از بلوغ آنتی بادی های IgG به آنتی ژن های توکسوپلاسمای 105 شکل 4-9: نتایج کیت میکروژن 106 شکل4-10: مقایسه اجرای تست Avidity با کیت Euroimmun و پروتئین GRA6 برای افتراق عفونت حاد و مزمن و تحت حاد............................................................................................................... 107 Abbreviations: AC- Affinity chromatography ADCC – Antibody – Dependent Cell – Mediated Cytotoxicity AIDS – acquired immunodeficiency syndrome APS – Ammonium persulfate BAG – bradyzoite antigen BCA – bicinchoninic acid assay BSA – bovine serum albumin CSF – Cerebrospinal fluid CD – cluster of differentiation DAB – Diamino benzidine DNA – Deoxyiribonucleic acid EDTA – Ethylenediaminetraacetic acid ELISA – Enzyme-linked immunosorbent assay EI – Enzyme immunoassay FPLC – Fast protein liquid chromatography FSH – Follicle – stimulating hormone FDA – Food and drug Administration GRA – granule antigen GST – glutathione S-transferase HCG – Human chorionic gonadotropin HIS-TAG – histidine-tag IEC – Ion-exchange chromatography IMAC – immobilized – metal affinity chromatography IPTG – Isoproyl –B-D-thio-galactoside Ig – immunoglobulin IFN- Interferon IL – interleukin LH- Luteinnizing hormone MBP – Maltose Binding Protein MAG – Matrix antigen MIC – Microneme NI-NTA – Nikel nitrilotriacetic acid OD – Optical density OPD – o – phenylenediaminedihydrochloride PBS – Phosphate – bufferedsaline PSA- Prostate – specific antigen PV – Parasitophorus vacuole PFGE – Pulsed Field Gel Electrophoresis PCR – Polymerase chain reaction RAI – Relative avidity index ROP – Rhoptry protein RNA – Ribonucleid acid SDS-PAGE – sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis SAG – surface antigen TBS – Tris buffered Saline TEMED – Tetramethylenediamine TMB – Tetra Methyl Benzidine Th – T –helper TRX – Thioredoxin TSH – Thriod – Stimulating hormone TNF – Tumor necrosis factor چکیده فارسی توکسوپلاسموزیس که توسط انگل اجباری درون سلولی توکسوپلاسما گوندی، ایجاد می شود. در افرادی که از سیستم ایمنی سالمی برخوردارند، عفونت اولیه معمولاً بدون علائم ویا با عوارض خفیفی همراه است، ولی در نوزادانی که عفونت را به طور مادرزادی دریافت کرده اند، ممکن است منجر به عوارض خطرناکی مثل عقب ماندگی ذهنی، کوری و یا حتی مرگ شود. بنابراین تشخیص صحیح عفونت اخیر (recent) توکسوپلاسما و تمایز آن از عفونت مزمن در زنان باردار، اهمیت حیاتی در مراقبتهای درمانی مادر و جلوگیری از بروز عوارض عصبی- مغزی در جنین دارد. از آنجایی که پاسخ آنتی بادی های IgM در درصد قابل ملاحظه ای از افراد، ماه ها یا حتی سال ها پس از کسب عفونت، مثبت باقی می ماند، تمایز صحیح میان عفونت حاد و مزمن به ویژه در زنان باردار، اهمیت فوق العاده ای دارد. در حال حاضر، بنظر می رسد ترکیب دو روش الایزای IgM و الایزای آویدیته IgG بهترین و مطمئن ترین نتایج را برای تشخیص عفونت حاد و تمایز آن از عفونت مزمن می دهند. شرایط بهینه روش IgG avidity ELISA برای تمایز سرم ها از عفونت حاد ومزمن با استفاده از دو پروتئین GRA7 وGRA6 برقرار (develop) شد. در نهایت ،کارایی روش avidity ELISA با استفاده از دو پروتئین فوق برای تشخیص عفونت حاد و مزمن در زنان باردار بررسی شد. در این تحقیق از کیت استاندارد Microgen جهت مقایسه نتایج ناهمخوان مابین کیت Euroimmun و پروتئین های نوترکیب GRA6 وGRA7 استفاده شد، نتایج بدست آمده از کیت Microgen دقیقا شبیه با پروتئین های نوترکیب بود. دراین تحقیق از 21 سرم حاد و 28 سرم مزمن و 29 سرم تحت حاد زنان مبتلا به توکسوپلاسما که حاد و مزمن وتحت حاد بودن آن با استفاده از تست های استاندارد سرولوژیک برای ما مشخص شده بود استفاده شد . از21 سرم حاد در آویدیته الایزا با پروتئین GRA6 ، تنها 1 سرم آویدیته بالا داشت و از 28 سرم مزمن ، 2سرم آویدیته پایین داشت و از 29 سرم تحت حاد 5 سرم آویدیته پایین داشتند. در آزمایش با پروتئین GRA7 از 21 سرم حاد، 1 سرم آویدیته بالا داشتند و از 28سرم مزمن همه سرم ها آویدیته بالا داشتند و از 29 سرم تحت حاد ، 6 سرم آویدیته پایین داشتند.همچنین در این تحقیق تعدادی از سرم ها که نتایج ناهمخوانی ما بین کیت Euroimmun و پروتئین های نوترکیب GRA6 و GRA7داشتند را با استفاده از کیت استاندارد Microgen بررسی کردیم که نتایج این کیت استاندارد شبیه پروتئین های نوترکیب GRA6 و GRA7بخصوص پروتئین GRA6 بود که این یافته ها کارایی بهتر GRA6 را نشان می دهد. استفاده از آنتی ژنهای نوترکیب به جای آنتی ژنهای توتال انگل در کیت تشخیصی آویدیته الایزا ممکن است منجر به افزایش کارایی آنها شده و استانداردسازی کیتها را نیز تسهیل کند. کلمات کلیدی : توکسوپلاسما،گوندی ،آویدیته الایزا ، GRA7 ،GRA6 مقدمه تاریخچه و طبقه بندی انگل توکسوپلاسما گوندی، یکی از اعضای شاخه اپی کمپلکسا، راسته کوکسیدیا، انگل اجباری درون سلولی بوده که بیماری توکسوپلاسموزیس را ایجاد می کند.این انگل با گسترش جهانی، قادر به تکثیر در بسیاری از میزبان های مهره دار از جمله انسان است. این ارگانیسم در سال 1908 توسط نیکول و مانسو در یک جونده کوچک به نام کتنوداکتیلوس گوندی در انستیتو پاستور تونس و تقریباً به طور همزمان توسط اسپلندور در برزیل در یک خرگوش آزمایشگاهی کشف شد. ابتدا تصور می شد این ارگانیسم گونه ای از جنس لیشمانیا است ولی یک سال بعد، پس از مطالعات بیشتر آن را به عنوان یک ارگانیسم متفاوت شناختند و نام جنس جدید توکسوپلاسما را برای آن پیشنهاد کردند)1و2(. اگرچه توکسوپلاسما گوندی عوارض متعددی در انسان بوجود می آورد ولی 15 سال بعد از کشف آن بود که انگل از اتوپسی چشم یک کودک مبتلا به هیدروسفالی جدا شد)3و4(. شیوع توکسوپلاسموزیس تا قبل از ابداع روش تشخیص سرولوژیکی تست رنگی به وسیله سابین و فلدمن در 1948 )5(، به طور دقیق مورد ارزیابی قرار نگرفت. فرنکل در سال 1970 چرخه زندگی را به طور کامل شناسایی و معرفی کرد )1(. موقعیت تاکسونومیک توکسوپلاسما گوندی بر اساس خصوصیات شکل شناسی و چرخه انگلی آن به وسیله ملهورن در سال 1988 به صورت زیر تعریف شده است. Kingdom: Protozoa Phylum: Apicomplexa Class: Sporozoea Sub-class: Coccidia Super- order: Eucoccidea Order: Eucoccidida Sub- order: Eimeriina Family: Eimeriidae Genus: Toxoplasma Species: gondii مورفولوژی و ساختار انگل توکسوپلاسما از دو کلمه توکسون به معنای کمان یا قوس و پلاسما به معنای سلول مشتق شده است، زیرا ارگانیسم شکل هلالی یا قوسی دارد. انگل دارای سه شکل در چرخه زندگی می باشد: 1-تاکی زوایت 2-برادی زوایت 3-اسپوروزوایت هر سه شکل انگل می توانند میزبان نهایی و واسطه را آلوده سازند )7(. ولی نقش بیولوژیک این سه شکل متفاوت است. شکل 1-1- شکل شماتیک یک تا کی زوایت (چپ) و یک برادی زوایت (راست) توکسوپلاسما گوندی )8( تاکی زوایت (اندودیوزوایت) تاکی زوایت شکل آزاد انگل و مربوط به مرحله تکثیر سریع آن است که قوسی شکل، به طول 4-8 وعرض2-4 میکرومتر می باشد. در عکس های حاصل از میکروسکوپ الکترونی سیستم پیچیده ای از اندامک ها شامل غشاء نازک پوشش خارجی، حلقه قطبی، یک مخروط تقریباً تو خالی و بدون رأس به نام کونوئید در انتهای نوک تیز (قدامی)، روپتری ها، میکرونم ها، میتوکندری ها، میکروتوبول های زیر غشایی، رتیکولوم آندوپلاسمی صاف و خشن، دستگاه گلژی، ریبوزومها، یک ارگانل شبیه پلاستید به نام آپیکوپلاست و میکروپور و هسته کاملاً مشخص را مشاهده کرد. )4( (شکل1-1). معمولاً هسته در جهت انتهای خلفی یا در ناحیه مرکزی سلول قرار گرفته است. کروماتین به طور انبوه در تمامی هسته پخش شده و معمولاً هستک در مرکز هسته جا دارد. کروموزوم ها طی میتوز متراکم نمی شوند، بنابراین، تعداد کروموزوم ها که 11 عدد می باشد ، اولین بار با استفاده از PFGE شناسایی شده است )9(. در مقاطع هیستولوژی تاکی زوایت ها اغلب تخم مرغی شکل می باشند )1(. تاکی زوایت ها به شرایط محیطی خیلی حساسند و معمولاً در خارج بدن میزبان سریعاً از بین می روند )6(. تاکی زوایت با هجوم فعالانه به غشاء سلول میزبان و یا به وسیله فاگوسیتوز وارد سلول میزبان می گردد. ابتدا انتهای کونوئید نفوذ نموده ، کونوئید به طرف جلو فرورفته و غشاء روپتری با غشاء واحد در انتهای خلفی توکسوپلاسما گوندی در آمیخته، و سوراخی را تشکیل داده که از طریق آن ترشحات روپتری آزاد می گردد. احتمالاً محتویات روپتری ها غشای پلاسمائی سلول میزبان را در اطراف انتهای قدامی توکسو پلاسما گوندی حل می نماید. زمانی که توکسوپلاسما گوندی وارد سلول میزبان می شود، غشای پلاسمائی پاره شده و گروهی از حفرات ریز یا وزیکول ها (احتمالاً ترشحات روپتری) در نواحی مجاور سیتوپلاسم دیده می شود. غشاء سلول میزبان تنها در انتهای قدامی توکسوپلاسما گوندی پاره می شود. در طی 15 ثانیه انگل در ماکروفاژ دیده شده، و دخول آن به وسیله فاگوسیتوز 120 ثانیه به طول می انجامد. به فاصله کوتاهی پس از نفوذ ، توکسوپلاسما گوندی به وسیله حفره یا واکوئل حامل انگل (PV) از سلول میزبان مجزا می شود. به نظر می رسد PV به طور دو جانبه از انگل و میزبان مشتق شده باشد )8(. تاکی زوایت به طریق غیر جنسی به وسیله آندودیوژنی مکرر در درون سلول میزبان تکثیرمی یابد (شکل1-3). آندودیوژنی شکل اختصاصی تقسیم بوده که در خلال آن دو سلول دختر تشکیل شده و سلول مادری تحلیل می رود. تقسیم تاکی زوایت ها به طریق آندودیوژنی تا پر شدن سلول میزبان از انگل ها ادامه می یابد. سلول های میزبان که حاوی تاکی زوایت های متعدد هستند، کلون ها، کلنی های نهایی یا پزودوسیست (کیست کاذب) نامیده می شوند. ندرتاً انگل های یک گروه به طور همزمان تقسیم شده، به طوری که معمولاًسلول های پروژنی به طور تصادفی یا بی قاعده مرتب می شوند. با این وجود، گاهی ممکن است تقسیم همزمان پروژنی انجام شده و توده رُز مانند تشکیل گردد. گروهی از تاکی زوایت هایی که به وسیله یک PV احاطه شده، کلون نامیده می شوند ) 8و4( . تاکی زوایت های توکسوپلاسما فاقد اندامهای حرکتی مانند تاژک ، مژه یا پای کاذب بوده و حرکت ارگانیسم با تا شدن بدن یا لغزیدن تواءم با چرخش در حول محور طولی بدن ، انقباض یا موج دار شدن انجام می گیرد(8و10). در مراحل اولیه عفونت توکسوپلاسمایی یا مرحله حاد بیماری ممکن است گروههایی از تاکی زوایت های در حال تکثیر در سیتوپلاسم سلولهای انواع بافتها مشاهده گردند که به مجموعه تاکی زوایت های داخل سلول میزبان کیست کاذب یا کلنی نهایی یا تجمعات انتهایی اطلاق می شود(8و10).این کلنی های تاکی زوایتی را می توان بر اساس تفاوت در رنگ پذیری از ارگانیسم های موجود در کیستهای حقیقی توکسوپلاسما متمایز نمود. شکل تاکی زوایت انگل در مرحله حاد عفونت دیده می شود و می تواند تمام سلولهای نسوج پستانداران را مورد حمله قرار دهد . پس از حمله ، انگل هر 4 تا 6 ساعت یک بار تکثیر می یابد و تجمعات شبیه به به آرایش گل تشکیل می دهد و سر انجام در هر سلول آلوده 16-8 و در مواردی تعداد بیشتری تاکی زوایت تجمع می یابد. سر انجام سلول با تعداد 64 تا 124 انگل پر شده و سپس سیتوپلاسم انباشته از تاکی زوایت سلول پاره می شود و ارگانیسم های آزاد شده به سلولهای مجاور حمله می کنند و در آنها به شیوه اندودیوژنی تکثیر می یابند(11).همچنین تاکی زوایت های آزاد شده از طریق جریان خون به بافت های متعددی از جمله سیستم اعصاب مرکزی ، چشم ،عضلات اسکلتی و قلبی راه یافته و سلولهای بافتی را آلوده می کنند. تکثیر انگل باعث ایجاد یک پاسخ التهابی شدید و تخریب بافت شده و بنابر این منجر به تظاهرات بالینی بیماری می گردد(11). شکل 1-2- عکس میکروسکوپ الکترونی یک تاکی زوایت، سوش VEGکه در حال نفوذ به یک نوتروفیل صفاق موش می باشد )8(. شکل 1-3- عکس میکروسکوپ الکترونی از تاکی زوایت سوش VEG در حال تقسیم اندودیوژنی داخل ماکروفاژ صفاق موش . برادی زوایت (سیستی زوایت) ماحصل سیکل غیر جنسی انگل در میزبان است که انگل در نسوج میزبان به صورت کیستی در می آید. اندازه آن بین 120-20 میکرومتر متغیر است )1(. کیست نسجی در واقع مرحله در حال استراحت انگل در بدن میزبان است این کیست ها در حقیقت مجموعه ای از برادی زوایت ها ی انگلی هستند که دارای جدار کیستی نازک می باشند(برادی در زبان یونانی به معنای کند و آرام ). برادی زوایت نیز توسط تقسیم دوتایی آندودیوژنی تکثیر می شود که بر خلاف تاکی زوایت به کندی صورت می گیرد )12(. تاکی زوایت تحت تأثیر فشار پاسخ ایمنی به برادی زوایت تبدیل می شود و تشکیل کیست می دهد. کیست های بافتی حاوی صدها و هزاران برادی زوایت می باشند. برادی زوایت های داخل کیست ها مادام العمر در میزبان باقی می مانند )11(. از نظر ساختاری برادی زوایت و تاکی زوایت اندکی متفاوت هستند . در برادی زوایت ها هسته در جهت انتهای خلفی قرار دارد. برادی زوایت باریک تر از تاکی زوایت بوده و در محتوای بالای میکرونم ها و گرانول های آمیلوپکتین (منبع انرژی) با تاکی زوایت متفاوت است )8و12(. دانه های لیپیدی در برادی زوایت دیده نمی شوند ولی گاهاً در تاکی زوایت دیده می شوند. در حضور آنزیم های پروتئولیتیک، برادی زوایت ها 1-2 ساعت پایدار می مانند ولی تاکی زوایت ها در مدت 10 دقیقه از بین می روند. در گربه که میزبان نهایی است، دوره کمون عفونت زایی (فاصله بین عفونت اولیه تا دفع اووسیست ها) برای برادی زوایت کوتاهتر از تاکی زوایت است )12(. علاوه بر سرعت همانند سازی، برادی زوایت ها وتاکی زوایت ها در بیان ژن و متابولیسم نیز متفاوت هستند. بیان بعضی ژن ها اختصاصی مرحله تاکی زوایت یا برادی زوایت می باشد. همچنین متابولیسم در برادی زوایت کندتر است. شکل 1-4- یک کیست بافتی توکسوپلاسما که حاوی بیش از هزار برادی زوایت می باشد)8(. اسپووزوایت از نظر شکل شناسی بسیار نزدیک به تاکی زوایت می باشد. در بررسی میکروسکوپ الکترونی نیز بسیار مشابه تاکی زوایت است، جز اینکه میکرونم ها و روپتری فراوانی در اسپور زوایت وجود دارد. روپتری ها یا متراکم هستند (در برادی زوایت) یا پراکنده هستند (در تاکی زوایت). اسپوروزوایت همانند برادی زوایت، تعداد بسیار زیادی گرانول های متراکم دارد. اسپوروزوایت شکلی از انگل است که مسئول تکثیر جنسی توکسوپلاسما گوندی در گربه (میزبان نهایی) می باشد و اووسیت ها را به وجود می آورد که قطر 10 تا 12 میکرومتر دارند و شکل مقاوم انگل به محیط بیرونی هستند و در مدفوع گربه دفع می شوند. اسپورولاسیون یک اووسیت تولید دو اسپوروسیت می کند که هر کدام حاوی دو اسپوروزوایت هستند )14(. تغییر اشکال مختلف توکسوپلاسما به یکدیگر و نقش آن در بیماری زایی توکسوپلاسما دریافت فایل توسعه تست آویدیته الایزا با استفاده از پروتئینهای نوترکیب برای تمایز عفونت حاد از مزمن توکسوپلاسما